Discover the world's research

Paraziták a széklet mikroszkópiájában

User Top Links

Content uploaded by Judit Plutzer Author content All content in this area was uploaded by Judit Plutzer on May 31, Content may be subject to copyright. Giardia duodenalis és Cryptosporidium spp.

Török Tamásné dr. Országos Környezetegészségügyi Intézet, Budapest A biztonságos, egészséges ivóvíz mindenki számára létfontosságú. Patogének megjelenése az ivóvízben az utóbbi időben egyre nagyobb problémát jelent világszerte. Az Európai Unió nagy hangsúlyt fektet ezeknek a patogéneknek a jelentőségére és támogatja az olyan irányú törekvéseket, hogy minél jobban megérthessük és kontrollálhassuk ezeknek a fertőző ágenseknek a pinworms az arcon vizeinkben.

A project fókusz alá helyezi a legfontosabb patogén vírusokat, baktériumokat és protozoákat reprezentatív európai vízműveknél, vaddiszno fereg vizsgálja azok emberi egészségre gyakorolt hatását. Paraziták a széklet mikroszkópiájában cél megvalósítása érdekében az alábbi feladatokat tűzte ki: a nukleinsav alapú kimutatási technikák validálása és alkalmazása, molekuláris felmérés és összehasonlító tanulmányok európai ivóvízellátókban, epidemiológiai felmérések, valamint összefüggések keresése az epidemiológiai, molekuláris és egyéb környezeti adatok között.

Cryptosporidium biológiája A Cryptosporidium rendszertanilag az Apicomplexa törzs, Sporozoae osztály, Eucoccidiida rend és Cryptosporidiidae család tagja, ámbár a legfrissebb biokémiai, genetikai és egyedfejlődési adatok rendszertani kérdéseket vetettek fel, melyek még megoldásra várnak. Jelenleg 17 faja ismert: 2 halakban C. Az SSU rRNA alapú molekuláris vizsgálatok alapján megközelítőleg 54 genotípust írtak le, melyek rendszertani helyzete bizonytalan és további vizsgálatokat igényel elhelyezésük Xiao et al.

A Cryptosporidium parvumot több szubtípus csoportra különíthetjük el a glikoprotein prekurzor fehérjét kódoló DNS szekvencia alapján, melyekből kettő, a IIa és IId szubtípus csoportok vesznek részt a zoonózisban Strong et al. A gazdaszervezetbe jutva a Cryptosporidium parvum oocisztából négy fertőzőképes sporozoit szabadul ki epesók és emésztőnedvek hatására, melyek a bél epitélsejtjeinek felszínére tapadnak.

Bélféreg – Hogyan szabaduljunk meg tőle?

A kialakuló trophozoit a fertőzött ileumban az epitélsejtek felszínéhez közel, paraziták a széklet mikroszkópiájában található, dezmoszómaszerű kapcsolata van a sejtekkel és ezen keresztül veszi fel a gazdasejtből a táplálékot. Ebből alakul ki az 1. A merozoitok szétszóródnak, majd a bélfalhoz tapadva 2.

Ezekből 4 merozoit keletkezik, melyekből gametociták fejlődnek. A gametocitákból ostor nélküli makro- paraziták a széklet mikroszkópiájában mikrogaméták alakulnak ki. A gaméták összeolvadása után kialakuló vastag falú oociszták a széklettel ürülnek, a vékony falú oocisztából kiszabaduló sporozoitok révén pedig a bélben újabb ciklus indul el Carey et al. A kriptosporidiozis a giardiozishoz hasonlóan napig tartó erős hasmenést esetleg hányingert, hányást, fejfájást, izomfájdalmakat, lázat jelent, paraziták a széklet mikroszkópiájában kiszáradás és leromlott állapot, elerőtlenedés.

Kezelés nélkül spontán gyógyul. A fertőzés immunhiányos betegeknél AIDS betegek halált is okozhat. Állatoknál tünetet leginkább akkor okoz, ha az állat fiatal illetve ellenálló paraziták a széklet mikroszkópiájában lecsökkent alultápláltság, elválasztás, zsúfoltság, hideg, fröccstej hiánya, egyéb társfertőzések.

Tünetmentes oociszta ürítés is lehetséges Xiao et al. A Giardia egy eukariota, ostoros, két sejtmagvú egysejtű. Rendszertanilag a Protozoa törzs, Sarcomastigophora altörzs, Zoomastigophora osztály, Paraziták a széklet mikroszkópiájában rend és Hexamitidae család tagja.

Teljes projekt lista

Jelenleg 6 faját ismerjük, melyből 1 kétéltűekben G. Ez utóbbi faj genetikailag meglehetősen heterogén: az Assemblage A-t és B-t emberben és emlősökben, az Assemblage C-t és az Assemblage D-t kutyákban, az Assemblage E-t háziállatokban főképpen szarvasmarhábanaz Assemblage F-et macskákban, az Assemblage G-t pedig patkányokban találták meg. Az A és B genotípusokon belül további szubgenotípusok különíthetőek el.

A Giardia sejt a fertőzött vékonybél kezdeti szakaszán, epicellulárisan található. Ez a vegetatív alak szívófelületével a bélhámsejtekre tapad. Növekedés, osztódás után encisztálódik. Ezt a folyamatot az organizmus számára kedvezőtlen körülmények, illetve a gazdaszervezet immunválasza indukálják. Az új szervezetbe került ciszta vegetatív formává alakul és kezdődik a folyamat elölről. Sárga, bűzös hasmenés, puffadás, hányinger, étvágytalanság, gyengélkedés, esetleg láz, a székletben megjelenő vér a heveny giardiozis velejárója.

  1. Bélféreg - Így szabaduljunk tőle! | BENU Gyógyszertárak
  2. Bélféreg, Bélférgesség - Betegségek | Budai Egészségközpont
  3. Általános székletelemzés - A máj March

A tünetek elhúzódhatnak kezelés nélkül akár évig isfokozódhatnak, enyhülhetnek. A fertőzés krónikus formába is átmehet. Állatoknál fejlődési visszamaradást okozhat, de halálos kimenetelű giardiozisról is beszámoltak már. Cryptosporidium és Giardia előfordulása vízellátókban A Cryptosporidium és Giardia fertőzés terjedhet emberről emberre fekál-orál úton, állatról emberre a hordozó állatoktól.

NKFI-EPR:Teljes projekt lista

A indirekt, vízzel közvetített fertőzésnek kiemelt a jelentősége, mivel fürdőzéskor vagy ivás során a kórokozó közvetlenül a bélcsatornába juthat. A vizek szennyeződését a szennyvizek szabadba vagy fogadóba engedése okozza, illetve paraziták a széklet mikroszkópiájában hordozó főként fiatal állatok ürülékéből kerülhetnek a protozoonok cisztái, oocisztái a nyersvízbe. Ennek kockázata az állattartó telepek környékén, tavasszal, az esőzések miatti árvizek idején a legnagyobb, ekkor az újszülött állatok száma is nagy.

Számos tényező hozzájárul a vízeredetű járványok, fertőzések kialakulásához: A Cryptosporidium és Giardia oo ciszták fertőző dózisa kicsi ciszta illetve oociszta. A Cryptosporidium oociszták mérete csupán µm, könnyen átjuthatnak a víztisztítás során a szűrőkön.

Az eltávolítás csak koaguláció és mikroszűrés 0, µm nagyságú részecskék eltávolítása vagy ultraszűrés 0,01 µm nagyságú részecskék eltávolítása alkalmazásával hatékony. Az oo ciszták nagyon ellenállók, mind vízben, mind talajban hetekig életképesek maradnak. Az a fertőtlenítőszer koncentráció, ami baktériumokhoz elegendő, a protozoonokhoz nem, az oo ciszták életképtelenné tételéhez különleges eljárás, ózon illetve UV alkalmazása szükséges.

Ezek a technológiák a legtöbb kis vízműnél nem találhatók meg 1,2. Ahhoz, hogy a Giardia és Cryptosporidium vízben való jelenlétének jelentőségét felbecsüljük rendszerszemléletre van szükség: a protozoonok vízből való pontos kimutatása mellett szükség van a vízgyűjtő területek védelmére, a víztisztítás optimalizálására és a tisztított ivóvíz védelmére egészen a fogyasztói felhasználásig.

A paraziták vízből történő koncentrálásához speciális Filta-Max szivacsszűrést és Millipore illetve Macherey-Nagel membránszűrést használtunk, nagy turbiditású vizek esetén pedig kálcium-karbonátos flokkulációt. A szivacsszűrőből illetve a membránszűrőről az oocisztákat foszfátpufferrel mostuk le.

Centrifugálással a mintákat tovább koncentráltuk, végül az oo cisztákat immunomagnetikus szeparációval IMS választottuk el a törmeléktől.

parazitá ellen termeszetesen ureaplasma urealitikum norma férfiakban

A Giardia ciszták székletből történő dúsításához immunomagnetikus szeparációt. Paraziták a széklet mikroszkópiájában mikroszkópos vizsgálathoz epifluorescens és paraziták a széklet mikroszkópiájában interferencia kontraszt mikroszkópiát használtunk.

A Giardia GSA 65 nevű fehérje kimutatása székletmintákból a Prospect T Giardia microplate assay-el történt a gyártó utasításai szerint. A DNS extrahálást Qiagen Stool kittel és Mini kittel végeztük a gyártó utasításai szerint, 10 olvasztási és fagyasztási ciklus beiktatásával az oociszták szétroncsolására. Nested illetve seminested PCR módszert alkalmaztunk mindkét protozoon esetében.

A PCR targetjei: a Cryptosporidium Paraziták a széklet mikroszkópiájában rRNA illetve bp hosszú szakaszai a faj és genotípus meghatározáshoz, a Cryptosporidum glikoprotein 60 prekurzor fehérjét kódoló gén bp hosszú szakasza a szubgenotípus meghatározáshoz, illetve a Giardia 18S rRNS bp hosszú szakasza faj és Assemblage meghatározáshoz és a glutamate dehidrogenáz-t kódoló paraziták a széklet mikroszkópiájában bp hosszú fragmentje a szubtípusok meghatározásához.

A keletkezett termékek azonosságát gélektroforézissel ellenőriztük. A keletkezett termék azonosságát olvadáspont analízissel ellenőriztük. A keletkezett termékeket gélelektroforézissel és Agilent Chip DNS analízissel a Bioanalyser készüléken végeztük a gyártó utasításai szerint.

A PCR termékek plazmidba ligálása Promega pGEM-T vektor felhasználásával történt a gyártó utasításai szerint, majd a plazmidot megtisztítja a vírusok és paraziták testét Escherichia coli DH5α sejtekbe és a sejteket felszaporítottuk. A plazmid izolálása a felszaporított Escherichia coli DH5 alfa sejtekből a Qiagen Plazmid Mini Kit felhasználásával történt a gyártó utasításai szerint.

Hogyan ismerhetjük fel a parazitafertőzést?

A szekvencia elemzéséhez és szerkesztéséhez a Chromas programot, a szekvenciák összehasonlításához a ClustalW programot, filogenetikai fák létrehozásához a www. Az egyedi illetve reprezentatív szekvenciákat feltöltöttük a génbankba és a génbankból referencia szekvenciákat is felhasználtunk a saját szekvenciák elemzéséhez.

Az összesen 36 mintából a protozoon koncentrálás után a minták feléből festés után mikroszkópos azonosítást végeztünk, majd a minták második feléből DNS extrahálás után a Cryptosporidium és Giardia SSU rRNS gén egy szakaszát szaporítottuk fel külön PCR reakcióban. A PCR termékeket szekvenáltuk, majd a kapott szekvencia analízise során állapítottuk meg a jelenlevő Giardia illetve Cryptosporidium fajt illetve genotípust.

Giardia esetében a szubtípusok meghatározására a glutamát dehidrogenázt kódoló PCR termékeket is analizáltuk. A szekvencia analízis alapján egy a Balatonba ömlő kisvízfolyásban új szubtípust azonosítottunk a G. Mindegyik megtalált faj humán patogén. A molekuláris analízis alapján a szennyvizek hatása az ivóvíznyerő helyekre jól nyomon követhető.

obstruktív sárgaság méregtelenítési módszerei a gyermekek férgek számára szánt drogok listája

Két helyen a szennyezés forrása ismeretlen. Paraziták a széklet mikroszkópiájában epidemiológiai felmérés két településen Az epidemiológiai felmérés célja a Giardiával fertőzött ivóvíz fogyasztása és az aszimptomatikus giardiozis kialakulása közötti lehetséges kapcsolat kimutatása volt.

Bélféreg – Hogyan szabaduljunk meg tőle?

A felmérésben 3 település vett részt. Közülük kettő, nyers- ill. Budapest szolgált kontrollként, mivel ennek ivóvízében a rutin vízminőség vizsgálatok soha nem mutatták ki a protozoonok jelenlétét. A vizsgálat céljaira a három település állandó lakosaitól székletmintát gyűjtöttünk A mintaadással egyidőben a vizsgálati alanyok egy életkörülményekre és szokásaikra vonatkozó validált kérdőívet is kitöltöttek.

Ezzel párhuzamosan a települések nyers- és ivóvízéből is történt mintavétel, amelyet a fent leírt módszerekkel vizsgáltunk a protozoonok jelenlétére.

a férgek mérete, ha férgek gyógyszereinek analógja

A három településen gyűjtött humán székletminták közül a fent leírt antigén kimutatási teszttel és immunofluorescens mikroszkópiával az egyik településen 4, a másik településen és budapesti széklet mintákban esetben volt Giardia pozitív a vizsgálat.

A négy pozitív székletmintában az első településen egyszer Assemblage A, egyszer Assemblage B és kétszer koinfekció volt kimutatható.

Bélférgek, bélférgesség

Ezzel ellentétben a második településen és a kontroll városban Budapest egy-egy székletmintában G. A kontroll városban a fertőzött személy valószínűleg utazásai során Ázsiában betegedett meg, míg a két faluban a fertőzött személyek nem számoltak be külföldi tartózkodásról.

10 GYILKOS PARAZITA, amikhez képest a horrorfilmek gyerekmesék

Az első településen, ahol az ivóvízforrásban a G. Az eredmények egy specifikus epidemiológiai szituációt mutatnak és jelentős információt hordoznak az aszimptomatikus giardiozissal kapcsolatosan. A vizsgálatok jelentősége, összefoglalás A giardiozis és kriptosporidiozis elterjedése az emberi populációban egyre nagyobb problémát jelent világszerte.

Ezeknek a patogéneknek a cisztái, oocisztái megjelenhetnek az ivóvízellátásban, rekreációs helyeken, a mezőgazdasági felhasználású vizekben.

Általános székletelemzés

Fejlett országok nagyobb sikerrel kontrollálják ezeknek a protozoonoknak a jelenlétét a vizekben, bár a vízminőségi problémák — ha kisebb számban is — de jelen vannak. Továbbá humán patogén Giardia duodenalis csoportokat és Cryptosporidium fajokat valamint egy új Giardia szubtípust azonosítottuk. Az eredmények nagymértékben hozzájárulnak az ember egészségének védelmében teendő intézkedések meghozatalához.

A jelenlegi tanulmány elsőként alkalmazza a Giardia és Cryptosporidium szimultán kimutatását és genotípizálását a magyar vízellátókban. Ugyanakkor azt is bemutatja, hogy mil.